中华人民共和国国家标准
谷物不溶性膳食纤维测定法
method for determination of insoluble dietary fiber in cereals
UDC 633.1:543.06
GB 9822－88
1 主题内容与适用范围
本标准规定了谷物不溶性膳食纤维测定所用仪器、试剂、分析步骤和结果计算。
本标准适用于谷物不溶性膳食纤维的测定。
2 方法原理
谷物样品经中性洗涤剂溶液浸煮，残渣用热水充分洗涤后，加入α－淀粉酶溶液以分解残留的结合态淀粉，再用水、丙酮洗涤，烘干，即为不溶性膳食纤维。
3 仪器和设备
3.1 提取装置：由瓶口装有冷凝器的300mL锥形瓶和可将100mL水在5～10min内由室温升至沸腾的可调电热板组成。
3.2 F3－2玻璃过滤坩埚（２号滤片，30mL容积）。
3.3 电热烘箱。
3.4 电热培养箱：温度保持在37±2℃。
3.5 干燥器：装有有效干燥剂。
3.6 过滤装置：由玻璃过滤坩埚和吸滤瓶组成，用水泵或真空泵抽滤。
3.7 粉碎机。
4 试剂
本标准所用试剂，除特别注明外，均为分析纯，水为蒸馏水。
4.1 十二烷基硫酸钠：化学纯。
4.2 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）(GB 1401)。
4.3 四硼酸钠（GB 632）。
4.4 磷酸氢二钠(GB 1263)。
4.5 乙二醇－乙醚：化学纯。
4.6 十氢萘：化学纯。
4.7 无水亚硫酸钠。
4.8 石油醚：沸程范围30～60℃。
4.9 磷酸二氢钠（GB 1267）。
4.10 丙酮（GB 686）。
4.11 α－淀粉酶1)（酶活性不低于每毫克800A）。
注：1)可采用上海生物化学研究所试剂厂生产的α－淀粉酶结晶冻干粉或类似产品，酶活测定方法见GB 9826《小麦粉碎损淀粉测定法α－淀粉酶法》附录Ａ（补充件）α－淀粉酶活性的测定。
4.12 甲萘（GB 684）：化学纯。
4.13 中性洗涤溶液的制备：将18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠用150mL水加热溶解，另将30g十二烷基硫酸钠和10mL乙二醇一乙醚溶于700mL热水中，然后加入到第一种溶液中。4.56g磷酸氢二钠溶于150mL热水中，加入到第一种溶液中，如果需要，用磷酸调节pH到6.7～7.1使用时若有沉淀形成，可加热到60℃使沉淀溶解。
4.14 α－淀粉酶溶液的配制：用0.1mol/L磷酸氢二钠和0.1mol/L磷酸二氢钠溶液各500mL，混匀，配成0.1mol/L磷酸缓冲液。称取12.5mgα－淀粉酶，用0.1mol/L磷酸缓冲液溶解，定容至250mL。
5 分析步骤
5.1 样品制备：谷物样品经合适的粉碎机一次研磨后全部通过1mm筛孔（试样细度约20～60目）。
5.2 精确称取制备好的样品0.500～1.000g，放入300mL锥形瓶中。
5.3 顺序加入：(a) 100mL中性洗涤溶液；(b) 2mL＋氢萘；(c) 0.50g无水亚硫酸钠。
5.4 在5～10min内，将300mL锥形瓶的内容物加热至沸腾，从沸腾开始计时，微沸1h。
5.5 洁净的玻璃过滤坩埚在110℃烘箱内干燥4h，放入干燥器中，冷却后称量，直至恒重。将经过中性洗涤溶液处理的纤维残留物加入，抽滤，用不少于300mL的100℃水清洗。
5.6 加入5mL α－淀粉酶溶液，抽滤，以置换清洗用水，然后用合适的胶塞塞住玻璃过滤坩埚的底部，加入20mL酶液和几滴甲萘。
5.7 放入37±2℃的培养箱中，保温18h。
5.8 取下塞子，抽滤，用不少于500mL水清洗纤维残留物，再用约 75mL 丙酮清洗。在100℃的烘箱中干燥4h，然后放入干燥器中，冷却后称量，直至恒重。
6 结果计算
6.1 计算公式：
不溶性膳食纤维（%）＝
式中：m1――玻璃滤器烘干质量，g；
m2――玻璃滤器及残留物烘干质量，g；
m――试样质量，g。
7 允许差
两个平行试样的测定值最大允许差为1.0%。以其算术平均值作为测定结果，保留一位小数。
附加说明：
本标准由商业部粮食储运局归口。
本标准由商业部谷物油脂化学研究所负责起草。
本标准主要起草人潘铎。
