生意经

中华人民共和国国家标准

粮食、油料检验

还原糖和非还原糖测定法

Inspection of grain and oilseeds

Methods for determination of reduced sugar and non-reduced  sugar

UDC  (633.1+633.85).001.4

GB  5513－85

     本标准适用于商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定。其中铁氰化钾法主要适用于小麦粉。

1  还原糖测定

1.1   铁氰化钾法

1.1.1   仪器和用具

1.1.1.1  磨口带塞锥形瓶：100ml；

1.1.1.2   量筒：50ml、25ml；

1.1.1.3   移液管：5ml；

1.1.1.4   玻璃漏斗；

1.1.1.5   试管：直径1.8～50px，高约450px；

1.1.1.6   铝锅：作沸水浴用；

1.1.1.7   电炉：2000W；

1.1.1.8   铁丝笼：放置试管用；

1.1.1.9   试管架；

1.1.1.10   锥形瓶：100ml；

1.1.1.11   微量滴定管：5ml或10ml(刻度0.02ml)；

1.1.1.12   分析天平：感量0.0001g。

1.1.2   试剂

1.1.2.1   95%乙醇；

1.1.2.2   乙酸缓冲液：3ml冰乙酸、6.8g乙酸钠和比重1.84的硫酸4.5ml，混合后用水稀释至1000ml；

1.1.2.3   12%钨酸钠溶液：12g钨酸钠Na₂WO₄·2H₂O溶于44.0g碳酸钠溶于1000ml水中；

1.1.2.4   0.1N铁氰化钾溶液：32.9g干燥纯净的铁氰化钾与44.0g碳酸钠溶于1000ml水中；

1.1.2.5   乙酸盐溶液：70g纯氯化钾和40g硫酸锌溶于水中，再加入200ml冰乙酸，再用水稀释至1000ml，混匀；

1.1.2.6   10%碘化钾溶液：10g纯碘化钾溶于100ml水中，再加一滴饱和氢氧化钠溶液；

1.1.2.7   1%淀粉溶液：1g可溶性淀粉，用少量水润湿调和后，倒入沸水100ml，继续煮沸，搅拌直至溶液清晰；

1.1.2.8   0.1N硫代硫酸钠溶液（按GB 5490－85《粮食、油料和植物油脂检验  一般规则》附录Ｂ进行配制和标定；

1.1.3   操作方法

1.1.3.1   提取样品液：精确称取粉样5.675g于100ml磨口锥形瓶中，用5ml乙醇浸湿全部试样，再加入50ml乙酸缓冲液，摇匀后再加入2ml钨酸钠溶液，在振荡器上混合振摇5min，取出过滤，弃去最初几滴滤液，收集滤液于干净锥形瓶中，此滤液即为样品测定液。另取一锥形瓶不加试样，同上操作，滤液即为空白液。

1.1.3.2   氧化：精确吸取样品液5ml于试管中，再精确加入5ml铁氰化钾溶液，混合后立即将试管（置铁丝笼中，每次可同时作若干样品测定）放入剧烈沸腾的水浴中，并使管中液面在沸水液面下3～100px，加热准20min后取出，立即用冷水迅速冷却。

1.1.3.3   滴定：将试管内容物倾入100ml锥形瓶中，用25ml乙酸盐溶液洗荡试管一并倾入锥形瓶中，加5ml 10%碘化钾，混匀后，立即用0.1N硫代硫酸钠滴定至淡黄色，再加1ml淀粉溶液，继续滴定直至溶液蓝色消失，记下用去硫代硫酸钠溶液体积（Ｖ_１）。

1.1.3.4   空白试验：吸取空白液5ml，代替样品液同1.1.3.2和1.1.3.3操作，记下消耗的硫代酸钠溶液体积（Ｖ₀）。

1.1.4   结果计算

还原糖含量先按公式（１）计算出氧化样品液中“还原糖”所需0.1N铁氰化钾溶液体积(V₃)，再根据此体积(ml)查表1，即可查得试样中含还原糖（以麦芽糖计算）的百分数。按公式（１）计算：

                    …………………………………………（１）

式中：V₀――滴定空白液消耗铁氰化钾溶液体积，ml；

      V₁――滴定样品液消耗铁氰化钾溶液体积，ml；

      V₃――氧化样品液中还原糖所需0.1N铁氰化钾溶液体积，ml；

      Ｎ――硫代硫酸钠溶液实际当量浓度。

双试验结果允许差不超过0.05%，求其平均数，即为检验结果。检验结果取小数点后第二位。

1.1.5   0.1N铁氰化钾（ml）与还原糖含量对照可查表１。

注：还原糖含量以麦芽糖计算。

1.2   费林氏液法

1.2.1   仪器和用具

1.2.1.1   古氏坩埚：25ml；

1.2.1.2   抽滤瓶：500ml；

1.2.1.3   真空泵或水泵等。

1.2.2   试剂

1.2.2.1   费林氏溶液；

     a. 碱性酒石酸铜甲液：取硫酸铜结晶34.639g，加适量水溶解，加硫酸0.5ml，再加水至500ml，用精制石棉过滤；

     b. 碱性酒石酸铜乙液：取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加适量水溶解，稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内。

1.2.2.2   精制石棉：先用3N盐酸将石棉浸泡2～3日后，用水洗净。再加10%氢氧化钠溶液浸泡2日～3日，倾去溶液，用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净。再以3N盐酸浸泡数小时，用水洗至不呈酸性，使之成为微细的软纤维，用水浸泡贮存于玻璃瓶内，作填充古氏坩埚用。

1.2.2.3  0.1N高锰酸钾标准溶液。

1.2.2.4   1N氢氧化钠溶液：取氢氧化钠4g，加水溶解至100ml。

1.2.2.5   硫酸铁溶液：取硫酸铁50g，加水200ml溶解后，慢慢加入硫酸100ml，冷后加水至1000ml。

1.2.2.6   3N盐酸：取盐酸25ml，加水至100ml。

1.2.3   操作方法

表1